蛋白质含量可从它们的物理化学性质，如折射率、比重，紫外吸收、染色等测定而得知；或用化学方法，如定氮、双缩脲反应、 folin-酚试剂反应、BCA法等方法来测定。 1 比色法 蛋白定量常使用的方法是比色法，通常用于总蛋白的定量分析。根据蛋白和比色试剂的结合，可以将比色法分为：蛋白-染料结合法和蛋白-铜螯合化学试剂法。前者对应的典型蛋白定量比色法是考马斯亮蓝G250染料结合法，后者则包括双缩脲法，Lowry法，二喹啉甲酸(BCA)法。 1、Brad

焦虑症是一种常见精神疾病，以急性焦虑反复发作为特征，主要表现为发作性或持续性的恐惧、担心和焦虑、紧张等情绪反应，并伴有自主神经功能失调、肌肉紧张与运动不安等症状。临床上焦虑症主要分为广泛性焦虑障碍、惊恐障碍、社交焦虑障碍、强迫障碍、特异性恐惧症等类型。在精神障碍中，焦虑症的终身患病率最高，影响到30%的人口的寿命，严重影响人们的生活质量和水平。 常用的大小鼠焦虑行为实验方法可以分为两大类，非条件反射和

在分子生物学研究中，酶切是一项常用的实验技术，用于切割DNA或RNA分子。然而，有时候我们会遇到酶切不完全的情况，即酶不能完全切割目标分子的现象。这可能会给我们的实验带来一些困扰，影响实验结果的准确性和可靠性。核酸内切酶 酶切不完全的原因有很多，下面我们将介绍一些可能的原因以及解决方法。 1 核酸内切酶酶切不完全的原因： 1. 质量不佳的DNA/RNA样本： 酶切的效果受到DNA/RNA样本的质量影响，如果样本受到污染或降解，酶切可能

医学核心行业痛点:1.价格贵2.周期慢3.成功率低 鱼和熊掌不可兼得，我认为的最优方案应该是:成功率保障的是前提条件下，客户需明确价格与周期的优先级。 价格优先级高，就选直投正常稿，价格低。（这个是我这边的模式） 周期优先级高，就选关系加急稿，周期快。

免疫组织化学技术：检测组织原位表达的肽类、激素、神经递质、细胞因子、受体、表面抗原等抗原性物质。 免疫 immuno- 抗原抗体的免疫反应 组织 histo- 检测组织中表达的抗原性分子 化学 chemistry 酶促/荧光可见反应 （一）组织和细胞标本的准备 1.组织标本的取材 —— 取材新鲜，固定及时，形态完好。 2. 细胞标本的准备 （1）活体细胞标本： 印片法、穿刺吸取法、沉淀法 （2）培养细胞标本： ① 细胞涂片: 将细胞制成悬液（10^6）涂在 涂有切片粘合

在分子生物学研究中，质粒构建和蛋白质表达是两项基础而关键的技术。然而，在实际操作过程中，小伙伴们可能会遇到各种问题。本文将探讨这些常见问题及其解决办法，以帮助水深火热中的小伙伴提高实验效率和成功率。 质粒构建常见问题及解决办法 怎样选取载体？ 载体一般可被划分为克隆载体与表达载体这两种类型。 克隆载体多数属于高拷贝载体，能够把外源基因跟克隆载体的质粒加以连接，导入原核细菌之中，实施大量的复制克隆。其主

1.牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用) 牛肉膏3g/L，蛋白胨5g/L，NaC1 10 g/L，琼脂1.5~2.0 g/L，pH 7.0~7.2。121℃灭菌20 min。JSENB品牌微生物培养原料一站供应。 2.高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用) 可溶性淀粉20 g/L，KNO3 1 g/L，NaCl 0.5 g/L， K2HPO4 0.5 g/L，MgSO4 0.5 g/L， FeSO4 0.01 g/L，琼脂 20 g/L，pH 7.2~7.4。 配制时，先用少量冷水将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其他成分，溶化后，补足水分至1000 ml。121℃灭菌20 min。 3. 查氏(Czapek)培养基(培养

立足于生物医学实验、快速检测一站式技术服务，是很早推出整体实验外包的服务机构。 经过10余年的发展，我们与国内超过百余家的研究机构上千名研究人员共同完成了12000+的实验项目,在中国生物医药实验技术服务领域极具行业影响力。 是一家科研CRO整体外包服务提供商，主要服务项目：生物模型、分子生物学、免疫学、蛋白质学、细胞生物学、病理毒理病毒、快速检测等科研服务。 六大实验平台：动物实验平台、细胞实验平台、分子实验平台

菌种活化就是将保藏状态的菌种 放入适宜的培养基中培养 逐级扩大培养得到纯而壮的培养物 即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物 菌种发酵有一般需要2-3代的复壮过程，因为保存时的条件往往和培养时的条件不相同，所以要活化，让菌种逐渐适应培养环境。 01、一般菌种临时存放及活化 1.低温保存管应存放于－20℃ ~ －80℃之低温条件下。 2.准备 37℃之 70﹪酒精浴槽（只能在电气水浴槽中改放酒精，不可以火加温，以免危险；若以 37℃水浴取代

活性氧（ROS）的流式检测通常是通过使用荧光探针如DCFH-DA来监测细胞内活性氧水平的变化。以下是该检测方法的一些关键步骤和原理： 01选择荧光探针常用的荧光染料是DCFH-DA，它能够进入细胞并在细胞内被酯酶水解成DCFH。DCFH随后可以被细胞内的活性氧氧化，生成发荧光的DCF。 02 DCFH-DA 是一种用于检测活性氧ROS的荧光探针，全称为2,7-二氯荧光素二乙酸酯。其工作原理为：DCFH-DA本身没有荧光，但可以自由穿过细胞膜，一旦进入细胞，它会被细胞内的酯

内参，顾名思义，就是内部参照。它在 Western Blot 实验中起到了重要的作用，用于校正蛋白质样本的加载量差异和检测系统的误差。就像是一把尺子，可以让我们在比较不同样本之间的蛋白质表达时有一个基准。 那么，如何选择内参呢？一般来说，我们需要考虑以下几个因素： 1、蛋白表达丰度：内参应该在样本中稳定表达，且表达量相对较高，这样才能有效地检测到内参信号。 2、分子量：内参的分子量应该与目标蛋白的分子量有明显差异，以便在

生物安全柜操作规范及维护保养 生物安全柜是能防止实验操作处理过程中某些含有危险性或未知性生物微粒发生气溶胶散逸的箱型空气净化负压安全装置。是实验室生物安全中一级防护屏障中最基本的安全防护设备。 为规范生物安全柜的操作，本文从人员、使用环境、设备操作流程及注意事项等几个方面进行阐述，使操作人员能够正确使用生物安全柜。 使用人员与环境 1、首先，微生物检测人员需进行生物安全柜的使用培训才能进行操作，未经正规

免疫荧光染色是实验室常用的技术之一，但在操作过程中，有许多需要注意的细节，任何一个环节的失误都可能导致实验失败。本文将为您介绍免疫荧光染色的注意事项，并附上零失误封片技巧。 1. 抗体选择：选择针对您研究的目标蛋白特异性高、亲和力强的抗体，一抗的浓度需要预实验摸索。一抗浓度过高(本身荧光实验，一抗的浓度就较高)，也是造成自发荧光强的重要原因。 2. 抗体稀释：根据抗体说明书建议，使用合适的稀释液和稀释比例进行

液氮罐的定义 采用真空绝热保温技术制作的容器，放液氮于其中，利用液氮常压下沸点-196℃的原理，实现生物样本长时间低温保存的设备。 液氮罐的分类 根据液氮罐的不同指标，液氮罐有不同的分类。 按用途分 按用途分，可以分为液氮存储罐和液氮运输罐两种。其中液氮存储罐适合于不同容量长时间的稳定存储，罐体不能用来运输，运输存在安全隐患。液氮运输罐具有体积小和减震结构设计，适用于少量样本的转移存储和短距离运输使用。 按液

脾细胞是ELISpot和FluoroSpot测定中使用最多的细胞，至少对小鼠和大鼠样本而言是如此。脾细胞可以很容易地从脾脏中分离出来，而不需要Ficoll分离。细胞可以在分离后直接使用，也可以冷冻保存，并在以后批量使用。 下面是编译自https://www.mabtech.com/knowledge-hub/isolation-freezing-and-tha的关于如何最好地（i）分离、（ii）冻存和（iii）复苏脾细胞的详细指南。 脾细胞的分离 材料 细胞过滤器，70µm尼龙，无菌 无菌剪刀和镊子或镊子 无菌培养皿 巴氏移液管，无

在现代抑郁症的行为学研究中，悬尾实验（TST）作为一种重要的实验方法，已被广泛应用于评估动物模型的抗抑郁行为。然而，品系差异、性别差异以及基因编辑动物模型的使用带来了复杂的挑战，这些因素对实验结果的准确性和可靠性产生了显著影响。 品系差异的影响 品系差异在抑郁症研究中扮演着重要角色，尤其是在悬尾实验中。Liu和Gershenfeld的经典研究揭示了11种不同品系小鼠在TST中的表现存在显著差异，尤其是在基线评分上。特别是DBA/2J、NMR

动物品系：成年健康大鼠 实验分组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组低、中、高三个剂量组 实验周期：N 建模方法：提起大鼠尾巴，置入小笼中。倒出适量乙醚于纱布上，置入鼠笼内，盖紧笼盖。待大鼠麻醉后取出，补充氯胺酮75～100mg/kg（ip）持续麻醉；阿托品20～30μg/kg腹腔注射，减少气道分泌物。固定大鼠仰卧于手术台上。剪除颈部及胸部被毛。纵形剪开颈部皮肤约1.5～2cm，分离皮下组织及肌肉。显露气管及其上甲状腺腺体。于腺体后

本期小助手帮大家详解一个细胞实验，从鼠的脂肪细胞中分离巨噬细胞的实验，步骤多、操作繁琐，但别急，跟着小助手一步一步来做，话不多说，上干货。 实验步骤 01 分离•用PBS清洗脂肪组织，并将组织放在冰上的培养皿中，用剪刀将组织切成小块（约3-5mm）。•将切碎的组织转移到含有7ml冰冷消化缓冲液的10ml圆底管中，此操作需一直保持在冰上。对于>1g的脂肪，将组织切碎并转移到含有10ml冰冷消化缓冲液的50ml锥形管中。•加入1ml（如脂肪组

一、原理： Cell Counting Kit-8（简称CCK-8）试剂含有WST-8，它在电子载体（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan dye）。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比，因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。 CCK-8法因其高灵敏度，无放射性的比色检测法的优点，可替代传统的MTT法。 二、检测步骤： 向96孔的各孔中加入100μl细胞悬液。 使用适当的培养基制备50,000-100,000个/ml的细胞悬液。 在37

开业至今，已有15年以上科研经验，一站式科研管家！ 动物模型、细胞实验、蛋白免疫实验、病理实验、分子实验、快速检测服务、组学服务、基因检测、生物信息服务等，祝大家科研顺利! 实验室位于北京大兴机场附近的固安肽谷生物医药产业园区，交通便利，环境优美，参与实验可提供住宿，欢迎前来参观洽谈，祝大家科研顺利，生活愉快!

实验技能分享免疫荧光 免疫荧光（Immunofluorescence，IF）是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一种强大的技术。它的原理是利用荧光标记的抗体作为探针对组织或细胞内的特定抗原进行定位和定性的分析。IF是一个很好的检测技术工具，用于研究感兴趣的产物如分子、蛋白质或糖蛋白的表达、定位、分布和迁移。 免疫荧光检测方法 直接免疫荧光：携带荧光素的抗体直接与抗原反应，形成抗原—荧光素标记抗体复合物。该法优点是较

在学习过程中，我们经常会遇到各种PCR字眼，什么qPCR、RT-PCR、RT-qPCR、Real-Time PCR，你了解PCR这个大家族吗？还在傻傻分不清吗？ 一、什么是PCR？ PCR是聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction）的简称，是一种体外扩增特定DNA片段的分子生物学技术。PCR技术自问世以来，在生物科学领域、分子诊断领域、亲子鉴定、法医鉴定以及犯罪调查等方面发挥了巨大作用，是迄今为止最为重要的技术之一。经过演化和革新，PCR技术已经发展了三代：普通PCR技术、实时

qPCR从样本采集到结果检出有很多的步骤，包括样本采集、样本保存、样本处理、样本检测、数据分析等一系列环节，不同的环节可以选择不同的对照进行监测，对照总体可分为阴性对照与阳性对照两类： 阴性对照 实验中经常遇到无法判断反应孔中的扩增信号是样本真实扩增还是污染扩增的情况，这就需要阴性对照来作为对比。常见的阴性对照有以下几种： ● 无模板阴性对照(No Template Control, NTC) NTC一般用纯化水代替，用以替代正常反应中的核酸样本

导读 合格的RNA样本是进行很多实验的前提，RNA质检有很多种方法，相对来说，琼脂糖凝胶电泳是一种非常好的RNA质检方法，既能检测RNA的完整性和浓度，还能判断RNA样本中是否有蛋白和gDNA的污染情况，而且不需要依赖特殊昂贵的仪器设备。但是RNA电泳虽然简单，也有很多注意事项，如果稍有不慎，电泳过程中RNA样本发生降解，即使合格的样本也会显示出不好的质检结果。 RNA电泳 VS 其它检测方法 常用的RNA质检方法有紫外分光光度计法（Nanodrop）、Qubit

在基因功能研究中常用两种基础策略，功能减弱或缺失，功能增强或获得。 实现基因功能减弱，可以采用RNA干扰（RNAi）技术下调目的基因表达。在RNAi使用中，siRNA或shRNA的设计是关键。长度约为21bp的siRNA与蛋白形成RISC复合物，结合目的基因的mRNA，从而使其降解，达到降低基因表达水平的目的（注意RNAi是作用于mRNA水平）。但需要引起注意的是，如果目的基因在细胞中本体表达就较低的情况下（一般ΔCT＞16），就不适合用RNAi了。 随着CRISPR/Cas9技术的成

采用“水上转盘法”建立大鼠全睡眠剥夺模型。本方法一是剥夺动物全部睡眠的方法,根据实验动物怕水的习性设计而成。剥夺装置主要由剥夺箱、转盘及转盘相连接的动力装置三部分组成。箱内盛水,转盘基座与箱底连接,周围注水,转盘高出水面,动物放在转盘上后,匀速转动。由于动物子啊睡眠状态时肌张力降低,离心作用使其掉入水中而惊醒,为避免掉入水中,动物必须不停活动,从而达到剥夺睡眠的目的。 模型制作方法: SD大鼠,体重140-150g,雄性。睡眠剥