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0逆转录过程需要考虑的因素: 一、基因组DNA的去除 某些情况下,痕量基因组DNA(gDNA)可能与RNA共同被纯化。污染gDNA可能会干扰反转录结果,导致RT-qPCR等高灵敏度实验出现假阳性、高背景或检测率降低。 为去除gDNA,通常在RNA分离过程中加入DNase I。在进行RT-(q)PCR之前,必须完全去除DNase I,因为任何残留的酶都会使单链DNA(如引物和cDNA)降解。通常,DNase I失活(如,EDTA和加热处理)或酶去除步骤会导致RNA降解或样品损失。 作为DNase I的替代品,可使
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0焦虑症是一种常见精神疾病,以急性焦虑反复发作为特征,主要表现为发作性或持续性的恐惧、担心和焦虑、紧张等情绪反应,并伴有自主神经功能失调、肌肉紧张与运动不安等症状。临床上焦虑症主要分为广泛性焦虑障碍、惊恐障碍、社交焦虑障碍、强迫障碍、特异性恐惧症等类型。在精神障碍中,焦虑症的终身患病率最高,影响到30%的人口的寿命,严重影响人们的生活质量和水平。 常用的大小鼠焦虑行为实验方法可以分为两大类,非条件反射和
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0抗体的孵育温度都有哪些?室温孵育:这通常指的是将实验样品放置在实验室的标准工作温度下孵育,一般为20-25℃。37℃孵育:这个温度接近人体体温,常用于ELISA等实验中的抗原-抗体反应。43℃孵育:有时为了加速抗原-抗体反应,可能会采用略高于37℃的温度,如43℃。4℃孵育:低温孵育可以减少非特异性结合,并且通常用于过夜孵育,以确保抗体与抗原有足够长的时间特异性结合。 冰箱温度孵育:有时也指4℃孵育,特别在放射免疫测定中,反应
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000高脂血症是指由于脂肪代谢异常所导致的血浆中一种或多种脂质高于正常水平的病症,且近年来其发病率呈现增加趋势。流行病学调查和研究表明,高脂血症是导致人类心血管疾病的首要因素。 对于该病的研究进程,无论是新药的研究与开发,还是临床的新兴治疗手段,皆离不开动物试验 的机制研究,因此最关键是建立理想的高脂血症动物模型。 一、实验动物 健康雄性8周龄清洁级SD大鼠,体重180g~220g 二、饲料 基础饲料60.8g+猪油15g+蛋黄粉10g+蔗0内参基因的表达水平在不同样本间相对稳定,因此可以用来标准化样本,校正实验数据,消除实验中因上样量不同,操作不同等实验操作产生的误差,确保实验结果的准确性。 让我们透过一个实验案例来探究内参基因与相对定量分析之间的联系。 评估肝癌细胞中A基因的表达量与正常肝细胞的相对变化。通过荧光定量检测,我们得知:肝癌细胞的A基因CT值为25,而正常肝细胞的A基因CT值为26。据此,利用表达量倍数的计算公式,我们得出肝癌细胞的A基000高脂血症是指由于脂肪代谢异常所导致的血浆中一种或多种脂质高于正常水平的病症,且近年来其发病率呈现增加趋势。流行病学调查和研究表明,高脂血症是导致人类心血管疾病的首要因素。 对于该病的研究进程,无论是新药的研究与开发,还是临床的新兴治疗手段,皆离不开动物试验 的机制研究,因此最关键是建立理想的高脂血症动物模型。 一、实验动物 健康雄性8周龄清洁级SD大鼠,体重180g~220g 二、饲料 基础饲料60.8g+猪油15g+蛋黄粉10g+蔗01934年,Goldblatt曾证实,狭窄狗肾动脉可产生持续性高血压,这一实验研究引起了人们的普遍重视。随后,世界各地相继开展了高血压病的动物实验研究,建立了不同的高血压动物模型,并提出了各种有关高血压病病原的学说。急性实验性高血压模型,常选用的动物有狗、猫、大白鼠、家兔和猴等。引起急性实验性高血压的方式很多,如直接刺激中枢神经系统、通过神经反射、外源性儿茶酚胺类或其它体液性加压物质的注射等。实验一般多在麻醉动物0糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)是一种严重威胁人类健康的慢性疾病,该疾病本身对机体的损伤有限,其众多的并发症是人类健康的主要威胁,严重影响患者的生存质量,甚至危及患者生命。糖尿病周围神经病变(Peripheral Diabetes Neuropathy,PDN)是糖尿病的主要并发症之一,发病率(60-70%)高,对患者的损伤大,临床以对称性麻木、电击样疼痛、腹胀、汗出等表现为主,特别是持续性蚁(虫)爬状麻木和电击样疼痛严重影响患者的生存质量,后果极其严重0为了排除某些因素对PCR结果的影响,PCR实验需要对照实验。PCR的阳性对照是Marker,推测PCR产物长度,判断PCR产物是否是目的片段。PCR的阴性对照是PCR的空白管,除了模板不加之外,其成分与其他管一样,证明没有其他模板污染。 由于目前所用的PCR仪器自动化程度较低,操作步骤较为繁杂,人为因素大,这就不可避免地会出现不同程度的误差。轻微的污染、加量的误差等均可导致结果较大的差异,甚至阳性和阴性出现两种迥然不同的结果。在分析测定40000【科研经验】关于实验结果不一致的那些事儿 大家都知道,理想情况下咱课题得从各种角度、用各种实验来论证同一件事。但实验中的影响因素多得很呐,有时就是得不到理想结果,不同实验的趋势都不一致,可太让人困惑啦!遇到这种问题先别慌,咱来仔细分析分析原因。 1. 这次结果靠谱不?做重复实验了没? 每次实验那就是一次抽样过程,可能会有各种误差。这次实验里是不是有啥可能导致误差的地方?像检测前样品没混匀好啊,WB 曝光时曝光0在细胞实验中,气泡的存在可能会对细胞产生一些不利影响,具体包括:细胞损伤:气泡可能会对细胞造成物理损伤,特别是当气泡在细胞培养过程中破裂时,产生的剪切力可能损伤或杀死细胞。气体交换受阻:细胞需要氧气进行代谢活动,同时需要排出二氧化碳。气泡可能会阻碍气体在培养基和细胞之间的交换,影响细胞的正常代谢。培养基成分变化:气泡可能会改变培养基中的气体组成,如降低氧气浓度或增加二氧化碳浓度,这可能会影响细胞的000终于有人把🐭动物实验设计一次性说清楚了 # 终于有人把动物实验设计一次性说清楚了‼🐭🔬 1⃣ 动物模型的选择: 包含数量、体重、性别、年龄等。📊📝 2⃣ 对照组的设置: (1)自身对照 (2)组间对照:正常组、模型组、阳性对照组、给药组 (3)小鼠标记法:染色标记法、耳标签法🔍🔬 3⃣ 剂量组别: (1)药效学一般设计三个剂量组 (2)剂量组别设置原则 ①量效曲线 ②等比级数递增💡💊 4⃣ 给药: (1)给药次数的确定 (2)给药方000肝性脑病(hepatic encephalopathy,HE)是在急、慢性肝病基础上发生的脑的神经功能紊乱。世界消化病学会将肝性脑病分为3种类型:A型为与急性肝衰竭相关肝性脑病,不包括慢性肝病伴发的急性肝性脑病;B型为不伴内在肝细胞疾病的门一体分流,肝组织学正常;C型为慢性肝病、肝硬化基础上发生的肝性脑病,常常伴门静脉高压和(或)门一体分流。肝性脑病发病机制尚未完全阐明,也无有效的防治手段,且严重影响患者的生活质量和生存期,是国内外000000原发性肝癌(PLC)是一种最常见的恶性肿瘤,我国每年有约13万人死于原发性肝癌。目前肝癌的临床治疗主要包括手术切除、放疗、化疗、靶向治疗等。VX2兔肝癌原位模型是迄今为止唯一能够在较大动物建立的肝转移性肿瘤模型,该模型多用于肝脏肿瘤的影像学和治疗学研究。该模型肿瘤发展过程与人肝癌相似,是最理想的肝癌实验模型,在该模型上开发出的药物和疗法对指导临床选择肿瘤治疗方案有重大意义。 1、实验动物 新西兰大白兔,雌雄各半0000多发性骨髓瘤 ( multiple myeloma,MM) 是一种浆细胞恶性增殖性疾病,发病率在血液系统肿瘤中位列第二。今天梳理两种皮下成瘤的方法。 一、RPMI8226骨髓瘤细胞悬液接种于裸鼠皮下的方法 1、实验动物:裸鼠,5~6周龄,雌性,体重17~20g 2、细胞株:人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞株 3、肿瘤细胞株的培养:人多发性骨髓瘤细胞株RPMI 8226,培养于10%胎牛血清、80U/L青霉素和0.08mg/mL链霉素的RPMI 1640培养液中,置37℃、5%CO2细胞培养箱中,约2~3d传代1次,实验用对数生长